激光掃描共聚焦顯微鏡是（shì）采用（yòng）激光作為光源，在傳統（tǒng）光學顯微鏡基礎上采用共（gòng）軛聚焦原理和裝置，並利用計算機對所觀（guān）察的對象進（jìn）行（háng）數字（zì）圖象（xiàng）處理的一套觀察、分析和輸出係統。把光學（xué）成像的（de）分辨率提高了30%~40%，使用紫外或可見光激發熒光探針，從而得到細（xì）胞或組織內部微細結構的熒光圖像，在亞細（xì）胞水平上觀（guān）察生理信號及（jí）細胞形態的變化，成為形態學，分（fèn）子生物學，神經科學，藥理學，遺傳學等領域中新一代的研究工具。

1 激光掃描共聚焦顯微鏡的原理

從基本原理上講,共聚焦顯微鏡（jìng）是一種現代化的光學顯微鏡（jìng）,它對普通光鏡從技術上作了以下幾點改進:

1、采用點掃描技術將樣（yàng）品分解成二維或三維空間上的無數點,用十分細小的激光束(點光源)逐點逐行掃描成像,再通過微機組合成一個（gè）整體平麵的或立體（tǐ）的像。而傳統的光鏡是在（zài）場光源下（xià）一（yī）次成像的,標本上每一點的圖像都會受到相鄰點的衍射光和散射光（guāng）的幹擾。這兩種圖像的清晰（xī）度和精密度是無法相比的。

2、用（yòng）計算機（jī）采集和處理光信號,並利用光電倍增管放大信號圖

3、用激光做光源因（yīn）為激光的單色性非常好,光源（yuán）波束的（de）波長（zhǎng）相同,從根本上消（xiāo）除了色差。

4、采用共聚焦技（jì）術在物鏡的焦平麵上放置了一個當中帶有小孔的擋（dǎng）板,將（jiāng）焦平麵以外的雜散光擋住,消除了球差;並進（jìn）一（yī）步消除了色（sè）差。

在共聚焦（jiāo）顯微鏡中,計（jì）算機代替了人眼或照相機進行觀察、攝像,得到的圖像是（shì）數字化的,可以在電腦中進行處理,再一次提高圖（tú）像的清晰度（dù）。而且利用了光電倍增管,可以將很微弱的信號放大（dà）,靈（líng）敏度大大提高。由於綜合利用（yòng）了（le）以（yǐ）上技術。可以說ＬＳＣＭ是顯微鏡（jìng）製作技術、光電技術、計算機技（jì）術的（de）完美（měi）結合,是現代技術發展的必然產物。

2 激光掃描共聚焦顯（xiǎn）微鏡在（zài）生物醫學（xué）研究中的應用（yòng）

目前,一台配置完備的ＬＳＣＭ在功能上已經完全能夠取代（dài）以往的任何一種（zhǒng）光學顯微鏡,它相當於多種製作精良的常用光學（xué）顯微鏡（jìng）的有機組合,如倒置光學顯微（wēi）鏡、紫外線顯微鏡、熒光顯微鏡、暗視野顯微鏡、相差顯（xiǎn）微鏡(ＰＨ)、微分幹涉差顯微（wēi）鏡(ＤＩＣ)等,因此被稱（chēng）為萬能顯（xiǎn）微鏡,通過它所得到的精細圖像可使其他的顯微鏡圖像無比遜色（sè）。

1、生化（huà）成分精確定位觀察配合專用的分子探針,對於要檢測的成分不僅可以定位到細胞

2、觀察活細胞、活組織ＬＳＣＭ在不損傷細胞的前提下,對活組織、活細胞進行觀察和測（cè）量，這不僅省去了繁瑣的樣品前（qián）期處理過程(如脫水、脫蠟、染色等);而且觀察過的樣品還可以繼續用於其他的研究。這種功能對於細胞培養、轉基因研究尤為重要。這可以說是ＬＳＣＭ最大的優勢。

3、定量測量首先應用專一的熒光探針（zhēn）對樣品進行染色,樣品的熒光強度和所（suǒ）測成分（fèn）的含量呈（chéng）正比,如果其餘條件固定,通過對比各組樣品之間（jiān）的熒光強度值,可得出特定成分的含（hán）量比。

4、動態觀察在同一樣品平麵上隨時間進行連續掃描,就可分析細（xì）胞結構、內含、和標（biāo）記等動力學變化。目前在這方（fāng）麵做（zuò）得最多的是使用ＬＳＣＭ觀察心肌或平滑肌細胞內遊離鈣、鈉、鉀離子濃度或ｐＨ的動態（tài）變化。

5、數據、圖像的數字（zì）化用計算機代替了（le）普通的照相機（jī）,得到的圖像是數（shù）字化的,可及時輸出或長期儲存,而且還可進一步加工處理。